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石蠟切片做**熒光,分享
日期:2024-11-24 05:22
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摘要:
石蠟切片做**熒光,分享
1,烤片,在恒溫箱中58攝氏度20分鐘。
2,脫蠟和水化。
三桶二甲苯,分別浸泡15分鐘。
100,95,85,70四桶酒精,分別浸泡5分鐘。
然后在水龍頭下,流水沖洗10min。
3,修復,我是用的檸檬酸緩沖液ph6的,高壓修復,高壓鍋噴氣后3分鐘。然后取出來自然降溫(我是浸泡在冷水中)。用PBS洗10min,三次。
4,甩干液體,用**組化筆畫圈。
5,0.2%的Triton破膜(我染的核蛋白),15min。
6,3%雙氧水阻斷,30min,然后PBS洗10min,三次...
石蠟切片做**熒光,分享
1,烤片,在恒溫箱中58攝氏度20分鐘。
2,脫蠟和水化。
三桶二甲苯,分別浸泡15分鐘。
100,95,85,70四桶酒精,分別浸泡5分鐘。
然后在水龍頭下,流水沖洗10min。
3,修復,我是用的檸檬酸緩沖液ph6的,高壓修復,高壓鍋噴氣后3分鐘。然后取出來自然降溫(我是浸泡在冷水中)。用PBS洗10min,三次。
4,甩干液體,用**組化筆畫圈。
5,0.2%的Triton破膜(我染的核蛋白),15min。
6,3%雙氧水阻斷,30min,然后PBS洗10min,三次。
7,5%BSA封閉1小時。
8,甩干液體,用1%BSA配一抗。室溫30min。然后4度冰箱過夜。
9,**天取出,室溫30min,PBS洗15min,三次。
10,甩干液體,避光加稀釋的二抗,孵育1小時,避光PBS洗15min,三次。
11,用DAPI染核,PBS洗。
12,加防粹滅劑,封片。
在熒光顯微鏡下看。