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24孔板里293細胞轉染后面的孔里細胞死亡原因
日期:2024-11-22 01:49
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摘要:
24孔板里293細胞轉染后面的孔里細胞死亡原因
問:我在24孔板里做293細胞的轉染,轉染試劑是invitrogen的Lipofectamine2000。奇怪的是,每次加完DNA- Lipofectamine complex,24個孔當中的后面幾個孔(比如*后6個孔)里的細胞就明顯有一部分死亡,死亡率是10-30%,通常*嚴重的是*后兩個孔。但是前面的孔里的細胞總是沒有問題。用不同的DNA做實驗,都發生同樣的問題,就是總是后面的孔里細胞死亡,而前面的孔里細胞沒問題。是怎么回事呢?
答:如果你在加DNA-Lipofectamine complex時孔板里是沒有液體的,會在...
24孔板里293細胞轉染后面的孔里細胞死亡原因
問:我在24孔板里做293細胞的轉染,轉染試劑是invitrogen的Lipofectamine2000。奇怪的是,每次加完DNA- Lipofectamine complex,24個孔當中的后面幾個孔(比如*后6個孔)里的細胞就明顯有一部分死亡,死亡率是10-30%,通常*嚴重的是*后兩個孔。但是前面的孔里的細胞總是沒有問題。用不同的DNA做實驗,都發生同樣的問題,就是總是后面的孔里細胞死亡,而前面的孔里細胞沒問題。是怎么回事呢?
答:如果你在加DNA-Lipofectamine complex時孔板里是沒有液體的,會在風機下風干的,很快的,這樣你在加到后面的孔時,部分細胞已經干了,所以你先加的很好,后面的就有問題。解決辦 法就是,你不要一起吸凈所有孔的液體,6個孔為一個單位,吸棄孔里的液體,在加DNA-Lipofectamine complex,就可以了。